阿折地平对自发性高血压大鼠心肌细胞凋亡的影响
时间:2022-05-08 17:55:02 浏览次数:次
[摘要] 目的 探讨阿折地平对自发性高血压大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法 将自发性高血压大鼠随机分为治疗组[阿折地平3mg/(kg·d)溶于生理盐水中灌胃]、SHR组,另选WKY大鼠为正常对照组,每组10只。分别每周测大鼠血压,10周后处死测其左心室肥厚指数,计数细胞凋亡数,ELISA法检测心肌细胞TNF-α的表达。结果 SHR组与WKY组血压无明显改变,治疗前后比较亦无明显差异(P>0.05),治疗组的血压较治疗前显著降低(P<0.01),与WKY组比较无明显差异,治疗组左心室肥厚指数、细胞凋亡指数及TNF-α的表达显著小于SHR组(P<0.01),治疗组与WKY组比较无显著性差异(P>0.05)。结论 阿折地平能有效的控制血压,能有效的抑制高血压所致的左心室肥厚、细胞凋亡及心肌TNF-α的表达。
[关键词] 阿折地平;细胞凋亡;大鼠
[中图分类号] R972[文献标识码] A [文章编号] 1673-9701(2010)04-29-03
Effects of Azelnidipine on Cardiomyocyte Apoptosis of Spontaneously Hypertensive Rats
HU LianfenLIU Guangde
Department of Cardiology,Zhuhai Municipal People’s Hospital,Zhuhai 519000,China
[Abstract] Objective To explore the effect of Azelnidipine on cardiomyocyte apoptosis of spontaneously hypertensive rats(SHR). Methods Twenty SHRs were randomly divided into 2 groups(treatment group and SHR group,with 10 rats in each) and treated with Azelnidipine for 10 weeks and control group(10 WKY rats) was treated with 0.9% sodium chloride solution.The rat blood pressure was measured every week. The rats were sacrificed after 10 weeks,the left ventricular hypertrophy index was measured,the number of cell apoptosis was counted,and the expression of myocardial cell TNF-αwas detected by ELISA. Results Compared with the control group,Azelnidipine could significantly reduce the 1eft ventricular hypertrophic index,cardiomyocyte apoptosis and TNF-α(P<0.01). Conclusion Azelnidipine can effectively control blood pressure,which will inhibit hypertension-induced left ventricular hypertrophy,apoptosis,and myocardial expression of TNF-α.
[Key words] Azelnidipine;Apoptosis;Rat
原发性高血压病(primary hypertension)是严重危害我国人民健康最常见的心血管疾病之一。长期高血压可导致以左心室肥厚(left ventricular hypertrophy,LVH)为主要特征的心脏病变;WHO已将逆转LVH及心功能异常、保护靶器官作为治疗高血压病的主要目标之一,因此LVH的逆转成为高血压研究领域的新热点。阿折地平是一种新型二氢吡啶类钙拮抗药,国外学者研究表明阿折地平对自发性高血压大鼠(spontaneous hypertension rat,SHR)的肾脏和心肌缺血的狗具有明显的器官保护作用[1,2]。这种作用是否通过削弱高血压发展过程中的心肌细胞凋亡,以及TNF的表达而实现,本实验就其具体机制进一步研究,为阿折地平在我国引进后的大规模临床应用提供试验依据。
1材料与方法
1.1实验动物及分组
14周龄雄性SHR大鼠(上海斯莱克实验动物中心提供)随机分为两组,SHR组(n=10)和阿折地平组(治疗组,n=10);另选同源同系、血压正常的Wistar-Kyoto大鼠(WKY),作为正常对照组(WKY组,n=10)。
1.2实验方法
阿折地平组:阿折地平(浙江健翔医药科技有限公司生产)3mg/(kg·d)溶于生理盐水中灌胃;SHR组和WKY组以等容量生理盐水灌胃。给药或对照剂持续时间为10周,直到鼠龄24周。
1.3观测指标
1.3.1一般项目观察大鼠的一般状况,用BP-6无创血压测试仪(成都泰盟科技有限公司提供)测定大鼠的尾动脉血压。实验前测定大鼠体重,实验后测定大鼠体重及左心室肥厚指数(左心室湿重/体重,LVW/BW,mg/g)。
1.3.2心肌细胞凋亡的检测按常规病理组织学方法制备心肌石蜡标本。TUNEL检测按试剂盒(武汉博士德分装)推荐的方法进行。TUNEL阳性反应为核呈棕褐色或棕黄色颗粒,核呈TUNEL阳性反应且具备细胞凋亡的形态学特征者被判定为凋亡细胞。在每张玻片上随机取4个视野,计数每个视野凋亡细胞的总数,并计算凋亡指数。
1.3.3ELISA法检测心肌细胞TNF-α的表达取100mg心肌组织/样本,提取心肌蛋白,用BCA蛋白定量液进行蛋白定量。严格按ELISA试剂盒检测程序测定TNF-α含量。结果判定是用ELX-800型酶联免疫仪,在490nm波长下读取光密度,结果以心肌组织蛋白含量标准化,其结果以ng/mg蛋白表示。重复上述实验3次。
1.4统计学处理
数据以均数±标准差表示,结果采用方差分析或t检验。
2结果
2.1阿折地平对高血压大鼠血压的影响
经阿折地平治疗10w后,SHR组与WKY组血压无明显改变,治疗前后比较亦无明显差异(P>0.05),但阿折地平治疗组的血压较治疗前显著降低(P<0.01),与WKY组比较无明显差异,见图1。
2.2阿折地平对高血压大鼠左心室肥厚指数的影响
治疗10周后治疗组左心室肥厚指数显著小于SHR组(P<0.01),治疗组与WKY组比较无显著性差异(P>0.05)。
2.3凋亡细胞计数
治疗10周后治疗组、SHR组、WKY组的心肌细胞凋亡指数分别为(104.34±35.38)‰、(502.13±54.84)‰和(23.13±12.25)‰。治疗组和SHR组心肌细胞凋亡指数明显地高于WKY组(P<0.01),而治疗组大鼠心肌细胞凋亡指数明显低于SHR组(P<0.05)。
2.4阿折地平对高血压大鼠TNF-α表达的影响
治疗10周后治疗组TNF-α的表达显著小于SHR组(P<0.01),治疗组与WKY组比较无显著性差异(P>0.05)。
3讨论
阿折地平(Azelnidipin)是2003年日本Sankyo公司与Ube公司联合开发的一种新型二氢吡啶类钙拮抗药,选择性作用于L-型钙通道,在日本已被批准用于治疗高血压,其降压疗效与肾上腺素β受体阻断剂和血管紧张素(angiotensin,AngⅡ)转换酶抑制剂相当。阿折地平对自发性高血压大鼠的肾脏和心肌缺血狗具有明显的器官保护作用[1,2]。阿折地平具有抗氧化特性,通过减弱局部氧化应激和抑制单核细胞趋化蛋白-1的过度表达,抑制动脉粥样硬化的形成[3,4];在体外,阿折地平也能减弱单核细胞趋化蛋白-1诱发的血管平滑肌细胞增殖和转移[4];在人类脐静脉上皮细胞,阿折地平通过降低NADPH氧化酶介导的活性氧簇抑制肿瘤坏死因子(TNF-α)活性和白细胞介素-8(IL-8)的表达[5,6]及内皮细胞炎症反应[7];在糖尿病大鼠,阿折地平通过抑制氧化应激而改善大鼠对葡萄糖的耐受性[8];在卒中型自发性高血压大鼠中,阿折地平治疗能够减弱交感神经反射,使脑、心脏和大动脉的内皮型氧化亚氮(eNOS)的生成增加[9-11]。
实验表明,高血压病心肌肥厚除了与间质增生,还与心肌细胞个体增大和凋亡的失衡有密切的关系。在血压升高早期心肌细胞以个体增大为主,凋亡相对不足[12]。新的研究发现,SHR的心脏由高血压发展为左心室肥厚(LVH),再发展到心力衰竭(CHF)的过程中,其心肌细胞增殖与凋亡存在明显的“时间窗”:1月内与5~17月以心肌细胞增大为主;1~4月与18月以后以凋亡为主。SHR出现LVH而尚未进展为CHF时,其心肌细胞凋亡指数与左心室心肌肥厚指数呈显著负相关,出现CHF后则心肌细胞凋亡明显增多[13]。
细胞凋亡又称细胞程序性死亡[14],是由遗传决定的生理性死亡。近年来的研究[15,16]表明,心肌细胞的凋亡参与高血压LVH的病理生理过程。高血压时,心肌和内皮、平滑肌细胞异常凋亡,一些散在的、选择性心肌细胞首先凋亡,释放ATP,又进一步刺激邻近的心肌细胞凋亡,形成恶性循环。凋亡心肌被胶原纤维取代,产生心肌纤维化、心肌肥厚。本实验表明阿折地平能显著的减少高血压时心肌细胞的凋亡数。
肿瘤坏死因子(TNF-α)是一种主要由单核-巨噬细胞分泌的具有多种生物学效应的细胞因子,已知TNF-α能诱导心肌细胞凋亡[17],虽然正常心肌很少或不表达TNF-α,但在高血压时,由于RAS系统激活,AngⅡ可以促使培养的心肌细胞在蛋白水平和mRNA水平表达TNF-α显著增高[18]。
本实验表明新型二氢吡啶类钙拮抗药阿折地平能有效的控制血压,能有效的抑制高血压所致的左心室肥厚、心肌细胞凋亡和心肌TNF-α的表达。但其具体机制仍有待进一步研究。
[参考文献]
[1] Sada T,Saito H. Pharmacological profiles and clinical effects of azelnidipine, a long-acting calcium channel blocker[J]. Nippon Yakurigaku Zasshi,2003,122(6):539-547.
[2] Kuramoto K,Ichikawa S,Hirai A,et al. Azelnidipine and amlodipine:a comparison of their pharmacokinetics andeffects on ambulatory blood pressure[J]. Hypertens Res,2003,26(3):201-208.
[3] Nakano K,Egashira K,Ohtani K,et al. Azelnidipine has anti- atherosclerotic effects independent of its blood pressure-lowering actions in monkeys and mice[J]. Atherosclerosis, 2007 May 2,[Epub ahead of print].
[4] Nakano K,Egashira K,Tada H,et al. A third-generation,long-acting,dihydropyridine calcium antagonist,azelnidipine,attenuates stent- associated neointimal formation in non-human primates[J]. J Hypertens,2006,24(9):1881-1889.
[5] Yamagishi S,Inagaki Y,Nakamura K,et al. Azelnidipine,a newly developed long-acting calcium antagonist,inhibits tumor necrosis factor-alpha-induced interleukin-8 expression in endothelial cells through its anti-oxidative properties[J]. J Cardiovasc Pharmacol,2004, 43(5):724-730.
[6] Nakamura K,Yamagishi S,Inoue H. Unique atheroprotective property of azelnidipine, a dihydropyridine-based calcium antagonist[J]. Med Hypotheses,2005,65(1):155-157.
[7] Naito Y,Shimozawa M,Manabe H,et al. Azelnidipine,a new calcium channel blocker,inhibits endothelial inflammatory response by reducing intracellular levels of reactive oxygen species[J]. Eur J Pharmacol,2006, 546(1-3):11-18.
[8] Iwai M,Li HS,Chen R,et al. Calcium channel blocker azelnidipine reduces glucose intolerance in diabetic mice via different mechanism than angiotensin receptor blocker olmesartan[J]. J Pharmacol Exp Ther,2006,319(3):1081-1087.
[9] Yoshikuni Kimura,Yoshitaka Hirooka,Yoji Sagara,et al. Long-acting calcium channel blocker,azelnidipine,increases endothelial nitric oxide synthase in the Brain and inhibits sympathetic nerve activity[J]. Clinical and Experimental Hypertension,2006,29(1):13-21.
[10] 英俊岐,王欲月,淮蓉晖,等. 高血压左室肥厚形成及其逆转研究进展[J]. 医学综述,2003,9(12):738-740.
[11] Franz H,Messerli,Reinhandkettlhut. Left ventricular hypertrophy:a pressure-independent cardiovascular risk factor[J]. J Cardiovasc Pharmacol,1993,22(suppl 1):S7-S13.
[12] 焦阳,洪小苏. 缬沙坦、依那普利、普萘洛尔对未成年高血压大鼠心脏重塑与心肌细胞凋亡的影响[J]. 江苏医药杂志,2003,29(4):255 -257.
[13] 李法琦,陈运贞. 自发性高血压大鼠心肌细胞凋亡的变化及其意义[J]. 中华心血管杂志,1999,27(6):459-463.
[14] 叶亚,赵人润. 细胞凋亡与内科疾病[J]. 西藏医药杂志,2003,18(4):23-25.
[15] 曾朝荣,陈维永,刘璟瑜. 高血压与左心室肥厚[J]. 中国心血管杂志,2002,7(1):54-56.
[16] 赵十超,韩跃刚,吴淑伦,等. 缬沙坦与苯那普利对高血压患者心肌纤维化及左室肥大逆转作用的对比研究[J]. 实用诊断与治疗杂志,2006,20(2):90-92.
[17] Kubota T,Miyagishima M,Frye CS. Overexpression of tumor necrosis factoraipha activates both anti-and pro-apoptotic pathways in the myocardium[J]. J Mol Cell Cardiol,2001,33(7):331-334.
[18] 李世英,倪新海,陈曦. 血管紧张素Ⅱ促进培养的新生鼠心肌细胞表达TNF-α[J]. 高血压杂志,2003,11(2):161-164.
(收稿日期:2009-10-28)
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