子宫内膜异位症患者腹腔冲洗液及血清CD133、ABCG2的表达

[摘要] 目的 探讨子宫内膜异位症（EMs）腹腔冲洗液、血清CD133、ABCG2水平与EMs发生发展的关系。 方法 选择2010年1月～2011年6月江苏省镇江市妇幼保健院收治的EMs患者38例为EMs组，选择同期其他妇科良性病患者22例为对照组。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测两组腹腔冲洗液及血清中CD133、ABCG2水平并分析其相关性。 结果 ①Ems组腹腔冲洗液CD133、ABCG2水平分别为（13.47±2.37）、（9.81±2.45）ng/L，高于对照组的（11.75±2.82）、（8.14±2.92）ng/L，差异均有统计学意义（P = 0.008、0.013）。血清CD133、ABCG2水平分别为（1.39±0.32）、（5.22±1.49）ng/L，高于对照组的（1.13±0.29）、（4.06±1.89）ng/L，差异均有统计学意义（P = 0.001、0.006）。②EMs组Ⅲ～Ⅳ期患者腹腔冲洗液CD133、ABCG2水平分别为（14.28±1.99）、（10.55±2.29）ng/L，高于Ⅰ～Ⅱ期患者的（12.35±2.44）、（8.79±2.36）ng/L，差异均有统计学意义（P = 0.011、0.027）；血清CD133、ABCG2水平分别为（1.53±0.31）、（5.83±1.39）ng/L，高于Ⅰ～Ⅱ期患者的（1.19±0.22）、（4.39±1.21）ng/L，差异均有统计学意义（P = 0.001、0.002）。③Ems组腹腔冲洗液CD133、ABCG2水平与血清CD133、ABCG2水平呈明显正相关（r = 0.579，P = 0.000；r = 0.703，P = 0.000）。 结论 腹腔冲洗液、血清CD133、ABCG2升高可能与EMs发生发展有关，有望单独或联合成为EMs诊断的新指标。

[关键词] 子宫内膜异位症；CD133；ABCG2；腹腔冲洗液；血清

[中图分类号] R711.71 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2013）08（c）-0045-03

子宫内膜异位症（endometriosis，EMs）是一种十分常见的妇科疾病，育龄妇女发病率为5%～15%，且近年来发病年龄日益提早，在18～24岁女性中发病率亦呈明显上升趋势[1]。EMs是引起不孕和盆腔疼痛的主要因素，Meuleman等[2]报道在不孕妇女中发病率达47%，同时合并盆腔疼痛者发病率甚至高达54%，严重影响广大妇女身心健康及生活质量[3]。

EMs相关症状并无明显特异性，通常需要手术方可完全确诊，目前认为腹腔镜是其诊断的金标准，但由于手术的侵入性及带来的相关费用，往往造成诊断和治疗时间的明显延迟[4-5]。因此，寻求更加简便和微创的诊断方法成为众多研究者的共同目标。近年来，干细胞成为EMs病因研究的热点[6]。分化抗原簇蛋白133（CD133）、三磷酸腺苷结合盒超家族G家族成员2（ABCG2）为常见的干细胞标志物，有关其与EMs相关性的研究并不多见。笔者前期研究中发现，CD133、ABCG2在EMs在位及异位内膜中存在异常表达，认为其可能与EMs的发生发展有关。本研究进一步探讨其在腹腔冲洗液及血清中的表达，了解其在EMs发生发展中的作用，为寻求新的诊断标志物提供理论基础。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2010年1月～2011年6月江苏省镇江市妇幼保健院（以下简称“我院”）妇科收治的术后病理诊断为EMs的患者38例为EMs组，其中Ⅰ～Ⅱ期16例，Ⅲ～Ⅳ期22例；选择同期因其他妇科良性疾病于我院手术治疗的患者22例为对照组，排除EMs，月经规律。两组患者均无肝、肾疾病，无其他自身免疫病史，无呼吸道高敏反应性病史，无原虫病史，术前3个月内未服用过激素类药物。两组年龄、孕产次及体重指数等一般资料比较，差异均无统计学意义（P > 0.05），具有可比性。本研究经我院伦理委员通过，患者知情同意，签署知情同意书。

1.2 方法

所有研究对象于术日清晨禁食12 h后取肘前静脉血3～5 mL，常温下静置1 h，离心半径15 cm，3000 r/min，离心20 min，取上清液，-70°C保存。两组患者均于术中吸取子宫直肠陷凹和子宫膀胱陷凹腹腔冲洗液10 mL，离心半径10 cm，3000 r/min离心20 min，取上清液，-70°C保存。有血液污染者则弃置不用。

将收集的标本同日成批进行检测，采用ELISA法分别测定EMs组和对照组腹腔冲洗液及血清CD133、ABCG2水平，实验过程严格按试剂盒说明书进行操作，最终结果由自动分析酶标仪生成并打印。

1.3 统计学方法

采用统计软件SPSS 17.0对数据进行分析，正态分布计量资料以均数±标准差（x±s）表示，两独立样本的计量资料采用t检验；相关性采用Pearson相关分析。以P < 0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组腹腔冲洗液、血清CD133、ABCG2水平比较

在EMs组中，腹腔冲洗液CD133、ABCG2水平分别为（13.47±2.37）、（9.81±2.45）ng/L，高于对照组腹腔冲洗液的（11.75±2.82）、（8.14±2.92）ng/L，差异均有统计学意义（P = 0.008、0.013）；血清CD133、ABCG2水平分别为（1.39±0.32）、（5.22±1.49）ng/L，均高于对照组血清的（1.13±0.29）、（4.06±1.89）ng/L，差异均有统计学意义（P = 0.001、0.006）。见表1。

2.2 EMs组不同分期腹腔冲洗液、血清CD133、ABCG2水平比较

在EMs组中，Ⅲ～Ⅳ期患者腹腔冲洗液CD133、ABCG2水平分别为（14.28±1.99）、（10.55±2.29）ng/L，高于Ⅰ～Ⅱ期患者腹腔冲洗液的（12.35±2.44）、（8.79±2.36）ng/L，差异均有统计学意义（P = 0.011、0.027）；血清CD133、ABCG2水平分别为（1.53±0.31）、（5.83±1.39）ng/L，均高于Ⅰ～Ⅱ期患者血清的（1.19±0.22）、（4.39±1.21）ng/L，差异均有统计学意义（P = 0.001、0.002）。见表2。

2.3 腔冲洗液与血清CD133、ABCG2相关性

在EMs组中，腹腔冲洗液中CD133、ABCG2水平分别约为血清中CD133、ABCG2的10、2倍，两者呈明显正相关（r = 0.579，P = 0.000；r = 0.703，P = 0.000）。

3讨论

EMs至今病因不明，多年来，广大学者从免疫、内分泌、基因、环境等方面进行了大量研究，均无法充分阐述其发病机制[7-8]。近年来，随着干细胞研究的迅速发展，这一领域亦成为EMs病因学研究的热点，且已有证据证明EMs与干细胞有关[9-11]。分CD133又称AC133，也被称为prominin-1，为具有独特的5个跨膜结构域和2个大的N-糖基化细胞外环的跨膜糖蛋白，其表达的一个显著特点就是随着细胞的分化迅速下调，这使得它成为一个分离和鉴定干细胞和祖细胞的独特分子标志。ABCG2是ABC转运蛋白家族成员之一，为一个跨膜结构域和一个核苷酸结合结构域构成的半分子ABC转运体，最初被发现可以主动地把具有不同化学结构和作用于细胞内不同靶位点的化疗药物泵出胞外，引起多药耐药。最近的研究显示，ABCG2还可能与干细胞分化状态和保护干细胞发育过程中免受周围环境的影响有关，是一种潜在的干细胞分子标记。已有文献表明，CD133表达于子宫内膜上皮细胞[12]，ABCG2阳性细胞广泛分布于子宫内膜基质[13]，但鲜见其与EMs相关性的研究。

本研究结果，EMs患者腹腔冲洗液和血清CD133、ABCG2的水平均明显高于对照组，且Ⅰ～Ⅱ期患者水平明显低于Ⅲ～Ⅳ期患者，随着疾病严重程度的增加，CD133、ABCG2水平的升高十分显著，由于CD133、ABCG2是公认的干细胞表面标志物，据此认为干细胞可能在EMs的发生发展中发挥作用。目前，腹腔冲洗液中CD133、ABCG2的具体来源尚不清楚，考虑腹腔冲洗液中CD133、ABCG2水平较血清中成倍增长，推测腹腔冲洗液中的CD133、ABCG2可能是腹腔局部的产物。根据Osuga等[14]的研究结果，EMs患者腹腔冲洗液中的干细胞因子水平明显高于对照组，而干细胞因子是一种多功能细胞因子，其可以和其他细胞因子一起诱导干/祖细胞增生、延长其存活期及引起干/祖细胞动员，但有关腹腔冲洗液中CD133、ABCG2与干细胞因子之间的关系尚不得而知。文献表明[15-16]，EMs的盆腔微环境中存在十分复杂的细胞因子调节网络，是EMs发病的决定性因素之一，因此，进一步研究腹腔冲洗液中CD133、ABCG2如何产生、受到何种因素的调节及通过何种途径导致EMs的发生发展对于探讨EMs病因将具有重要意义。

目前，血清CA125是最为广泛接受的EMs无创性诊断指标，Child等[17]对23个研究结果进行Meta分析证实，CA125对诊断中到重度EMs的特异性可高达89%，但其诊断轻度EMs的敏感性和特异性有限，且检测结果明显受到月经周期的影响。近年来，亦有不少学者对大量生物标志物应用于EMs的诊断进行相关研究[18-21]，但发现每种标志物单独应用于诊断的精确性仅接近甚至低于CA125。因此，今后的研究方向应该是联合应用3～4种血清生物标志物来进一步提高EMs的早期诊断率及无创性诊断的准确性。本研究结果显示，CD133、ABCG2血清水平与腹腔冲洗液水平呈正相关，说明血清CD133、ABCG2水平能够反映腹腔局部CD133、ABCG2情况，且EMs血清CD133、ABCG2水平明显高于对照组，因此认为血清CD133、ABCG2有望单独或联合成为EMs无创诊断的新指标。但因研究样本量有限，具体应用效果有待大样本支持及进一步临床验证。

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（收稿日期：2013-05-18 本文编辑：李继翔）

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