蒺藜甾体苷提取工艺研究

摘要 目的：对蒺藜中甾体皂苷提取工艺加以研究。方法：用水和不同浓度的乙醇进行提取，采用大孔吸附树脂柱层析法和中性氧化铝测定其中甾体皂苷的含量，流动相为甲醇：水＝1：1。结果：水提取法测得含量为3.23%，乙醇提取测得含量为1.89%。提取率水提法为11.84%，采用乙醇提取的方法提取率为6.959%。结论：白蒺藜提取的最佳工艺为用水煎3次，每次2.5h，第一次加水7倍量，第二、三次分别加水6倍量，中性氧化铝柱层析法进行精制，流动相甲醇：水（1：1）,水提取比醇提取的优点是提取率大，成本低，污染小。

关键词 蒺藜；甾族皂苷；含量测定；大孔树脂；中性氧化铝。

中图分类号R284.1文献标识码：B

蒺藜为蒺藜科植物蒺藜的干燥成熟果实，气微，味苦辛。具有平肝解郁，活血祛风，明目，止痒的作用。目前所知其所含成分中甾体皂苷为其有效部位，其皂苷元为薯蓣皂苷元、鲁斯克皂苷元、绿吉托皂苷元【1】。

1 仪器与药品

1.1仪器

万分之一电子分析天平（中国上海精密仪器厂 型号JA2003）;101—R型电热鼓风干燥箱（上海阳光实验仪器有限公司）;5200H型超声波清洗器（上海科岛超声波仪器有限公司）；HH.SY11-Ni电热恒温水浴锅（北京长源试验设备厂）

1.2药品

蒺藜果实（经山东中医药大学中药鉴定教研室周凤琴老师鉴定，为蒺藜科植物蒺藜Tribulus terrestrisl的干燥果实，实验用其粗粉），大孔树脂（层析用，中国医药集团上海化学试剂有限公司），中性氧化铝（层析用，中国医药集团上海化学试剂有限公司），试剂均为分析纯或色谱纯。

2实验方法与结果

2.1 提取方法

查阅文献【2】得知，水提取与乙醇提取均是较为理想的提取甾体皂苷的方法，本试验对两种提取方法进行了优选。具体试验方法如下：

2.1.1水提取法

取蒺藜果实50克，捣碎，第一次加7倍量水浸泡12h，煎煮2.5h,第二、三次分别加6倍量水，煎煮2.5h。合并提取液浓缩至1.05～1.15g/ml(60℃)，加50ml乙醇低温沉淀，放置48h,取上清夜至已干燥至恒重的蒸发皿中，水浴蒸干。放入干燥箱内烘至恒重（105℃），称重，得提取物5.675g.

2.1.2醇提取法

取蒺藜果实50g，捣碎加400ml10％乙醇浸泡24h，回流6h，趁热滤过，药渣再加300ml10％乙醇回流4h，趁热滤过，合并滤液，常压回收乙醇（78℃）得30ml提取液至已干燥至恒重的蒸发皿中，水浴蒸干。放入干燥箱内烘至恒重(105℃)，称重，得提取物量。30％、50％、75％、95％乙醇提取方法同上。

由表1可知：50％乙醇提取率最高。

2．3总皂苷的精制

查阅文献【3】可知大孔树脂柱和中性氧化铝对甾体皂苷都有很好的分离效果，因此本试验对两种柱色谱进行了优选。

将水提和醇提得到的提取物，加蒸馏水超声溶解用4倍量的乙醚萃取，弃去乙醚层除去脂溶性杂质，再用4倍量醋酸乙酯萃取，弃去醋酸乙酯层除去黄铜类杂质，最后用水饱和的正丁醇萃取除去水溶性杂质，保留正丁醇层，回收正丁醇至无醇味，用蒸馏水定容至100ml.

取水提样品液及醇提样品液20ml分别通过大孔树脂和中性氧化铝，水洗除去糖类成分，再用甲醇：水（1：1）的混合液100ml洗脱，保持流速3ml/min，收集洗脱液置水浴上蒸干，冷却，用甲醇3ml溶解，滤过至105℃干燥至恒重的称量瓶中，用甲醇15ml，分四次洗涤容器及滤纸，洗液并于称量瓶中，至水浴上蒸干，105℃干燥3h，精密称定，得水溶性总皂苷的量。结果显示用大孔吸附树脂得到的皂苷含量为0.65%、0.55%，而中性氧化铝为3.23%、1.89%，中性氧化铝对甾体皂苷的精制效果比大孔吸附树脂好，因此应选用中性氧化铝对甾体皂苷进行精制。

3 讨论与小结

水提和醇提在提得皂苷的同时均带入了大量的鞣质，多糖，叶绿素，单糖和氨基酸等成分。由于这些物质往往是植物中的主要成分，因此提取液中皂苷只占很少的一部分而其余大部分是杂质，因此甾体皂苷分离的第一步就是除去这些杂质。

通过以上试验，蒺藜提取的最佳工艺为50％乙醇提取两次，第一次加10倍量提取6h，第二次加8倍量提取4h,用中性氧化铝柱层析法进行精制，流动相甲醇：水（1：1）。

参考文献

[1]黄泰康.常用中药成分与药理手册[M].北京：中国医药科技出版社，1994,第1版；1709.

[2] 刘玉川,曹春林,郝清春.中成药水煮提取工艺考[J].中国中药杂质，1996，21（10）：610.

[3]吕华瑛.中药成分分离新技术及应用[J].山东中医杂志,2005，24（9）：562-565.

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