虫草素调控eIF2α/TGF—β/Smad信号通路改善肾间质纤维化的机制

材料

1.1 动物 体重约20 g的C57BL/6雄性小鼠（SPF）购自并饲养于日本山梨大学（University of Yamanashi）动物实验中心。所有小鼠均给予标准饮食，并自由饮水。小鼠适应性饲养1周后开始正式实验。

1.2 药物与试剂 虫草素购自Sigma-Aldrich公司，重组TGF-β购自R&D System公司。抗总eIF2α抗体购自Santa Cruz Biotechnology，抗磷酸化eIF2α（phosphorylated eIF2α，p-eIF2α）抗体、抗α-SMA抗体、抗磷酸化Smad2/3（phosphorylated Smad2/3，p-Smad2/3）抗体、抗Smad2/3抗体、β-actin抗体以及辣根过氧化物酶（horseradish peroxidase，HRP）标记的相应二抗均购自于Cell Signaling公司。总RNA提取试剂盒购自Promega公司。

2 方法

2.1 肾间质纤维化模型制作 参照Chevalier的方法^[13]进行UUO手术。小鼠经麻醉后分离左侧输尿管，以0号丝线在2处不同部位完全结扎；对照组仅接受麻醉、打开腹腔并分离左侧输尿管，但不进行结扎操作。

推荐访问： 纤维化 虫草 通路 调控 信号

---