不同方法干燥紫苏梗迷迭香酸含量HPLC法检测分析

材料与方法

1.1    仪器与药品

普析L600-2高效液相色谱仪，普析L600-UV紫外检测器，LCWIN2.0色谱工作站;SHIMADZU AUW220D型（Max=220 g/82 g，Min=1 mg）和双杰JJ500型（Max=500 g，d=0.01 g）电子天平;新龙XL-100型多功能高速粉碎机;沪南电炉烘箱厂202-00A型电热恒温干燥箱（1 200 W，10～300 ℃）;天津奥特赛恩斯AS5150型超声波清洗仪;迷迭香酸对照品采购于北京益尔康乐生物科技有限公司（批号：111871-201706，供含量测定用）;甲醇为色谱纯，甲酸为分析纯，丙酮为色谱纯，水为重蒸水。

1.2    样品采集与处理

试验检测用紫苏梗采自河南省商丘市夏邑县紫苏种植基地。紫苏梗收获期，从基地采取不同批次、不同部位的样品进行不同干燥方法处理。样品分为A、B、C 3批，A批为鲜品，2018年10月6日采集;B批为经过1 d日晒的半干品，2018年10月2日采集;C为雨后采集鲜品，2018年9月17日采集。其中A批收集9份样品，分别编号为A1、A2、A3、A4、A5、A6、A7、A8、A9;B批收集样品5份，分别标号为B1、B2、B3、B4、B5;C批收集1份样品。每份样品3株紫苏。共采集45株紫苏，分为15份样品。将干燥后的样品粉碎，过3号筛，装样品袋，编号，常温保存，待检[12-13]。

1.3    对照样品溶液的制备

精密称取迷迭香酸对照品10 mg，置25 mL容量瓶中，加60%丙酮至刻度，摇匀，精密量取5 mL，置于50 mL量瓶中，加60%丙酮至刻度，摇匀，配制成浓度为40 μg/mL的对照品溶液，避光冷藏[14-15]。

1.4    供试样品溶液的制备

参照2015版《中国药典》[1]的提取方法進行。每份样品，精密称定样品粉末（过3号筛）约0.5 g，分别置于具塞锥形瓶中（准确编号），精密加入60%丙酮25 mL，密塞，称定重量，超声处理（250 W，40 kHz）30 min，再称定重量，用60%丙酮补足减失的重量，摇匀，0.2 μm微孔滤膜过滤，续取滤液，置于进样瓶中，即可。

1.5    色谱条件

参照2015版《中国药典》第四部（通则0512）高效液相色谱法[11]，并经试验确定色谱条件。色谱柱为Hypersil-C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）;流动相为甲醇-0.1%甲酸水溶液（38∶62）;流速为1.0 mL/min;检测波长为330 nm;柱温为25 ℃;理论塔板数以迷迭香酸计算不低于3 000。

1.6    样品含量测定

按照1.4的方法制备供试品溶液，分别进样10 μL;精密吸取40 μg/mL对照品溶液10 μL进样3次[16-17]。计算公式具体如下：

样品含量（%）=（Ax×Cr×25）/（Ar×Mx×106×（1-N））×100

式中，Ax为供试品的峰面积;Ar为对照品的峰面积;Cr为对照品溶液的浓度（μg/mL）;Mx为供试品取样量（g）;N为样品含水量（%）。

2    结果与分析

根据已有的方法学结果[11]以及研究组前期试验结果，本试验的线性关系、精密度、重复性、稳定性、回收率等均符合试验要求。

从表1可以看出，不同的干燥方法对紫苏梗的有效成分含量影响比较大。对一步干燥（A批）样品检测结果对比分析发现，在适当的温度范围内，随着烘干温度的升高迷迭香酸含量明显降低，这说明高温会促使紫苏梗里的有效成分迷迭香酸散失或降解;阳光棚晾干（A5）的紫苏梗样品迷迭香酸含量高于晒干（A4）、烘干紫苏梗样品（A1、A2、A3）的迷迭香酸含量;在相同的干燥方法下，侧枝样品（A8、A9）迷迭香酸含量均高于主干（A6、A7）和全株（A2、A5），主干样品和全株样品（A6和A2，或A7和A5）的迷迭香酸含量基本一致，这是由于侧枝在全株茎杆中的占比很小所致;经过两步干燥的（B批：先日晒1 d成半干品，再分别45 ℃烘干、60 ℃烘干、75 ℃烘干、晒干和阳光棚晾干）紫苏梗样品，迷迭香酸含量普遍比较低;经受雨淋的紫苏梗样品（C批），迷迭香酸含量显著下降，为0.006%，远远低于药典规定，这与迷迭香酸分子极性相关的水溶解性有极大的关系。在所有的样品检测统计结果中，经过阳光棚晾干的紫苏梗侧枝迷迭香酸含量最高，高达0.830%，为药典标准的8倍多;在所有的全株茎杆样品中，阳光棚晾干（A5）的紫苏梗样品迷迭香酸含量最高，为0.450%，晒干（A4）的紫苏梗样品迷迭香酸含量次之，为0.430%;在烘干处理的样品中，45 ℃烘干（A1）的紫苏梗样品迷迭香酸含量最高，为0.310%，以上三者均高于药典标准数倍。

3    结论与讨论

试验结果表明，紫苏梗鲜品经过一步干燥得到的紫苏梗药材迷迭香酸含量普遍远高于经过二步干燥得到的紫苏梗药材。因此，紫苏梗的产地初加工干燥应在采鲜后及时一步干燥。

紫苏梗产地初加工干燥以阴干最佳，直接晾晒与低温烘干亦可。连续阴凉天气最适宜紫苏梗采收干燥;若遇采收期天气晴朗，建议在阴凉棚里阴干，若条件不允许，晒干亦可;若环境空气潮湿，不适宜自然干燥，亦可使用人工干燥箱低温烘干。

紫苏梗采收前应关注当地气象，准确判断未来几日的天气情况，紫苏梗的采收不能在下雨天进行，这是因为经过雨水淋湿的紫苏梗中有效成分迷迭香酸含量会急剧减少，为不合格品。

紫苏侧枝迷迭香酸含量远高于主干，但生产中以产量最大化的指导策略致使紫苏梗以主干为主，侧枝甚少。因此，生产上紫苏种植应合理密植，以提高紫苏侧枝数量。此外，也可以选育多生侧枝的紫苏品种，以提高紫苏梗的品质。

4    参考文献

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