产植酸酶芽孢杆菌对艾维茵肉鸡生产性能、免疫器官指数和肠道菌群的影响

材料与方法

1.1 材料

1.1.1 菌种 产植酸酶纺锤形赖氨酸芽孢杆菌B.Ld2-C制剂（经液体发酵制备，含活菌数1×1010 CFU/g），由河南科技大学宏翔生物饲料实验室分离保存。

1.1.2 试验动物分组与管理 选取1日龄健康艾维茵肉鸡240只，随机分为4组，每组20只，3个重复。对照组饲喂基础饲料；试验组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组在基础饲料中分别添加终浓度为1.0×106、1.0×107、1.0×108 CFU/g的产植酸酶芽孢杆菌B.Ld2-C制剂。试验期为42 d。基础饲料参照我国饲料成分及营养价值表（2014年第25版）肉鸡营养需求配制。试验期间各组饲养管理条件一致。

1.2 测定指标

1.2.1 生产性能 分别在试验鸡1、7、14、21、28、35、42日龄时空腹称重，记录各组鸡的体重和耗料量，计算各组平均日增重、平均日采食量和料重比。

1.2.2 免疫器官指数 分别在鸡只21 d和42 d时，从各组每个重复随机抽取3只鸡称重并剖杀，取脾脏、法氏囊和胸腺，剔除脂肪后称重，计算免疫器官的绝对质量并计算免疫器官指数，计算公式为：免疫器官指数（g/kg）=免疫器官重（g）/体重（kg）

1.2.3 肠道菌群 在上步剖杀鸡的同时，取中段回肠约3 cm结扎后送实验室无菌取样1 g，加入9 mL生理盐水，充分混匀，进行10梯度稀释，取合适梯度的稀释液20 μL分别滴种到乳酸杆菌（MRS培养基）、双歧杆菌（BBL培养基）、大肠杆菌（伊红-美兰培养基）的专性培养基进行相应的微生物数量测定。用1 g肠内容物所含细菌数量的对数[lg（CFU/g）]表示。

1.3 数据统计与分析

所有数据采用SPSS 19.0软件进行统计分析，采用单因素方差分析one-way ANOVA进行差异性比较，差异显著者用Duncan氏法进行多重比较。数据以平均值±标准误表示，P>0.05表示差异不显著，P<0.05表示差异显著，P<0.01表示差异极显著。

2 结果与分析

2.1 产植酸酶芽孢杆菌对肉鸡生产性能的影响

产植酸酶芽孢杆菌对肉鸡生产性能的影响见表1。由表1可知，21日龄内，与对照组相比，试验Ⅰ组和试验Ⅱ组的平均日增重均极显著提高（P<0.01），且极显著高于Ⅲ组（P<0.01）；试验Ⅱ组的料重比显著低于其余各组（P<0.05），其余各组间的料重比无明显差异（P>0.05）。22～42日龄，与对照组相比，试验Ⅰ组和试验Ⅱ组的平均日增重有上升的趋势，但两者间无显著差异（P>0.05）。在1～42日龄，试验Ⅰ组和试验Ⅱ组的平均日增重显著地高于对照组（P<0.05），料重比显著地低于对照组（P<0.05）。

2.2 产植酸酶芽孢杆菌对肉鸡免疫功能的影响

产植酸酶芽孢杆菌对肉鸡免疫功能的影响见表2。由表2可知，各组间的胸腺指数、法氏囊指数和脾脏指数均无显著差异（P>0.05），但试验组与对照组相比均有提高趋势，表明添加芽孢杆菌能有效提高肉鸡免疫器官指数。总体来讲，试验Ⅱ组的免疫器官指数最高。

2.3 产植酸酶芽孢杆菌对肉鸡主要肠道菌群的影响

从表3中可知，21日龄时，在乳酸杆菌和双歧杆菌数量方面，试验Ⅱ组极显著地高于对照组（P<0.01），试验Ⅰ组显著高于对照组（P<0.05），试验Ⅲ组也高于对照组，但差异不显著（P>0.05）；各试验组的大肠杆菌数量与对照组相比均极显著地降低（P<0.01），各试验组之间差异不显著（P>0.05）。42日龄时，各试验组的乳酸杆菌细菌数量极显著的高于对照组（P<0.01），而大肠杆菌数量极显著的低于对照组（P<0.01），各试验组的双歧杆菌数显著高于对照组（P<0.05）。

3 讨论

3.1 产植酸酶芽孢杆菌对肉鸡生长性能的影响

Li等[4]研究发现，饲料里添加B. subtilis CGMCC 1.1086明显促进了AA肉鸡的日增重和饲料转化率。谭莉等[5]研究发现地衣芽孢杆菌制剂和枯草芽孢杆菌制剂能显著提高1～21日龄肉鸡平均日采食量和平均日增重，有增加料重比的趋势。由此可见，饲料中添加芽孢杆菌对肉鸡的生产性能有一定的促进作用。本试验表明，肉鸡日粮中添加一定剂量的芽孢杆菌制剂，可显著提高肉鸡的体重并降低料重比。本试验采用在饲料中添加菌粉的方式饲喂肉鸡，剂量分别为1.0×106、1.0×107、1.0×108 CFU/g。从整个喂养过程来看，按照1.0×107 CFU/g剂量添加时，不管是在增加肉鸡的平均体重还是降低料重比上，效果均优于1.0×106、1.0×108 CFU/g剂量添加组，表明菌量加的过多或过少都不能明显增加肉鸡的生长性能，有时反而会降低生长性能。

3.2 产植酸酶芽孢杆菌对免疫功能的影响

禽类最重要的免疫器官就是胸腺、脾脏和法氏囊，其中胸腺是细胞免疫的中枢器官，法氏囊是禽类特有的体液免疫器官，脾脏则是禽类最大的外周免疫器官，参与了全身的细胞免疫和体液免疫。免疫器官指数是这些免疫器官占活体体重的比例，这个比例反映了这些器官的相对发育程度，也反映了机体的免疫功能。近年的研究表明，芽孢杆菌能促进动物免疫器官的发育，能提高动物机体的T细胞、B细胞的数量，提高动物体液和细胞免疫的水平。林显华等[6]研究发现枯草芽孢杆菌可显著提高饲喂雏鸡的脾脏指数和法氏囊指数。潘宝海等[7]发现在肉鸡日粮中添加芽孢杆菌能可明显提高免疫器官指数和血清中IgG水平。李卫芬等[8]研究表明枯草芽孢杆菌可促进雏鸡盲肠和回肠黏膜中IL-2、IL-4、IL-10和TNF-α的表达。本试验也发现试验组添加产植酸酶芽孢杆菌B.Ld2-C后其免疫器官指数高于对照组，按1×107 CFU/g剂量添加时，肉鸡免疫器官指数最高，表明在饲料中添加一定量的芽孢杆菌可提高机体的免疫水平。

3.3 产植酸酶芽孢杆菌对肉鸡肠道菌群的影响

一般来说，健康动物肠道中各种细菌的比例基本是保持不变，动物长期持续饲喂芽孢杆菌可产生病原菌拮抗物质，拮抗肠道病原细菌，起到维护和调节肠道微生态平衡的作用。芽孢杆菌为需氧菌，在生长过程中需要大量的氧气，大量吸收了动物肠道内游离的氧，降低了肠道内氧的浓度，有利于乳酸杆菌、双歧杆菌等厌氧菌的生长，同时使肠道中需氧菌的生长受到抑制，从而提高动物机体的抗病能力。叶玉娥等[9]将芽孢杆菌制剂饲喂肉鸡后可显著降低肉鸡盲肠道内的大肠杆菌数。杨家军等[10]研究表明，在痳鸡日粮中添加地衣芽孢杆菌能增加肠乳杆菌和双歧杆菌数量，减少肠球菌和葡萄球菌的数量。本试验中添加植酸酶芽孢杆菌B.Ld2-C肉鸡的乳酸杆菌和双歧杆菌的数量均上升，大肠杆菌数量下降，其中1.0×106 CFU/g和1.0×107 CFU/g添加量的作用更明显，表明产植酸酶芽孢杆菌B.Ld2-C可以优化肠道菌群结构，促进有益菌的增殖。

4 结论

本试验结果表明，饲料中添加产植酸酶芽孢杆菌B.Ld2-C可显著提高艾维茵肉鸡的生产性能，极显著地改善肠道菌群，且可提高免疫器官指数，按1.0×107 CFU/g剂量添加的效果优于其他添加剂量。

参考文献：

[1] 高旭东，黄 鑫，郝宝成，等.动物源性食品中性激素残留的危害及检测方法[J].黑龙江畜牧兽医，2015（21）：274-277.

[2] WANG J H，ZHAO L Q，LIU J F，et al. Effect of potential probiotic Rhodotorula benthica D30 on the growth performance， digestive enzyme activity and immunity in juvenile sea cucumber Apostichopus japonicus[J].Fish Shellfish Immunol，2015， 43（2）：330-336.

[3] LIU X，CAO G，WANG Q，et al. The effect of Bacillus coagulans-fermented and nonfermented Ginkgo biloba on the immunity status of broiler chickens[J]. J Anim Sci，2015，93（7）： 3384-3394.

[4] LI Y，XU Q，HUANG Z，et al. Effect of Bacillus subtilis CGMCC 1.1086 on the growth performance and intestinal microbiota of broilers[J]. J Appl Microbiol，2016，120（1）：195-204.

[5] 谭 莉，袁 栋，张云兵，等.不同类型芽孢杆菌制剂对肉鸡生长性能和排泄物氨逸失的影响[J].动物营养学报，2012，24（5）： 877-885.

[6] 林显华，孙合美，谷 巍.枯草芽孢杆菌B7对肉鸡生长性能及免疫性能的影响[J].中国畜牧兽医，2013，40（2）：91-95.

[7] 潘宝海，孙冬岩，王文娟，等.芽孢杆菌对肉鸡免疫机能的影响[J].饲料研究，2014（21）：46-47.

[8] 李卫芬，文 静，吴红照，等.枯草芽孢杆菌对肉鸡生长性能和肠黏膜抗氧化及免疫功能的影响[J].中国畜牧杂志，2011，47（9）： 58-61.

[9] 叶玉娥，叶 明，张 蓉，等.芽孢杆菌制剂对艾维茵肉鸡胴体性能和肠道菌群的影响[J].浙江大学学报（农业与生命科学版）， 2012，38（3）：305-310.

[10] 杨家军，钱 坤，章 薇，等.地衣芽孢杆菌对肉鸡肠道菌群和小肠形态学的影响研究[J].中国兽医学报，2014，34（4）：664-668.

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