血浆脂蛋白琼脂糖电泳的改进

文章编号：1006-5962（2013）06-0312-01

血浆脂蛋白琼脂糖电泳是医学院校生物化学和临床生化的基本实验。在实验教学过程中进程遇到由于学生加样不好和纱布与电极槽相连不当，出现电泳条带不整齐或琼脂糖凝胶破裂影响实验结果。笔者在教学过程中通过对加样方法和纱布与电极槽相连的改进，是一般学生自己初次操作都能取得满意实验结果。

1 加样方法改进

传统的先在凝固的琼脂糖凝胶板距一端的2cm处，用自制打孔器（在小玻璃片的两面固定两片小胶片）垂直打入凝胶后立即取出，然后用胶片剥出长方小条凝胶。用小片滤纸吸干小槽中的水分，注意不要损坏槽边缘的凝胶。最后，再用微量注射器吸取经过预染的血清约20ml注入凝胶板上的小槽内。

改进后在凝固的琼脂糖凝胶板距一端的2cm处，用电泳厚滤纸垂直插入凝胶后稍等片刻（大约15秒）取出，立刻用微量注射器吸取经过预染的血清约20ml注入凝胶板上的狭缝内（图1）。

a 1、4为改进前加样效果 2、3为改进后加样效果

b 1、2 自制打孔器和剥刀 3 厚电用滤纸

2 纱布与电极槽相连改进

传统的将凝胶玻璃板放入电泳槽两根塑料横杆上，用在妥缓冲液浸湿的两层滤纸或纱布轻轻紧密贴在凝胶板两端，纱布的另一端浸于电泳槽内的巴比妥缓冲液中，接通电源，电压为100～120V，每片电流为3～4mA，约经电泳40～60min，可见分离脂蛋白色带。

改进后将凝胶玻璃板放入电泳槽两根塑料横杆上，同时在玻璃板两侧分别再放一塑料横杆，用在妥缓冲液浸湿的两层滤纸或纱布先轻轻紧密贴玻璃板两侧的塑料横杆上，纱布的另一端浸于电泳槽内的巴比妥缓冲液中，使滤纸或纱布重心在此塑料横杆上，然后将两层滤纸或纱布轻轻紧密贴在凝胶板两端，接通电源，电压为100～120V，每片电流为3～4mA，约经电泳40～60min，可见分离脂蛋白色带（图2）。多放两个塑料横杆主要是避免凝胶拉破。

3 实验结果比较

通过对加样方法和纱布与电极槽相连改进，电泳结束后玻璃板上琼脂糖凝胶完整，没出现破裂，电泳结果条带整齐，并且明显看出三条电泳区带。而改进前电泳结果很容易出现月牙形和拖尾现象，区带不好区分。

参考文献

[1] 生物化学与分子生物学实验技术教程 苏燕 军医出版社 2013.4

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