土壤中放线菌的分离与应用

材料与方法

3.1试验材料

土壤样品采自台州市黄岩区菜地，宁波地区菜地10～20cm深土层，分别取土壤10g，混合，过筛。

3.2放线菌各处理组合试验设计方法

以不同地区土样、抑菌剂重铬酸钾（100mol/E）、溫度3个因素设计单因素实验。具体见表1及注释。

试验选取250mL三角瓶，根据设计进行编号，装入100mL无菌水，放入玻璃珠，121℃高压灭菌2小时，无菌条件下加入4g土样，无菌条件下10倍浓度进行梯度稀释，抽取稀释10-3的土壤悬液1mL置于相应的培养基内，然后用灭过菌的涂棒涂抹进行涂布分离，每个处理各设置3个平行试验，3～5d进行筛选分离放线菌于高氏一号培养基上，3～5d观察试验结果。

3.3试验数据记录与处理

3.4小结与讨论

（1）金华地区的土壤偏碱性且污染较少，放线菌含量比台州地区高，放线菌生长过程中，100ml/L的重铬酸钾抑制剂既可以有效抑制细菌增长，同时也可以促进放线菌生长，而放线菌最适宜的生长条件是含抑制剂，温度为28℃，土壤为偏碱性且污染少。

（2）采集的土样应新鲜使用，暂时不使用应低温保存，保持放线菌的活性，可保存后的土样含水量增多，有利于细菌生长，不利于放线菌的分离，故使用前应风干后，在土壤悬浮液中增加酵母膏。

4展望

步入21世纪，人们对农产品要求越来越高，过去纯化学的农药时代已经翻篇，人们对无毒害的农产品的需求不断增加，逐渐利用微生物解决植物因虫害、病原菌等因素导致产量低下的问题。同时，可持续发展成为一种理念，通过放线菌等微生物对污染的化学物质进行降解成为理想的选择。放线菌不仅对农业、生态环境具有积极意义，而且对医药中抗肿瘤活性的发展具有极大的发展前景。

目前，对放线菌作用于植物病害防治的研究已经取得了很大进展，但投入应用的过程中还存在一些问题：（1）对普遍存在的放线菌的研究与筛选中，发现新的化合物概率极低，既耗时又耗资源。（2）中国是个资源大国，可真正的技术开发能力、人员能力毕竟有限，中国的抗生素产业还存在很多问题，如以仿制为主，同质化严重，产能过剩，环保压力和低水平重复建设等。故应多开发具有知识产权的抗生素，国家应投入更多的资金于新化合物的开发，加强研发水平。（3）抗生素滥用的情况比比皆是，若研究出的新抗生素，应如何规范、合理地使用，势必成为一个有争议的问题。（4）往往在实验室研究成果明显，可投入批量生产，结果却不尽人意。鉴此，新产品应考虑到自身局限性，并克服，可采取试点方法进行试验。对具有极强生命力的产品进行大力推广，并采取积极引导使用，确保滥用情况。

（收稿：2017-01-10）

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