不同地区天南星中秋水仙碱含量的测定与比较

材料：分别购于河南、河北、广西、云南、安徽药材市场以及采自吉林地区的天南星及其炮制品。

（2）试剂和药品。分析纯：甲醇、氯仿、盐酸、石油醚、正丁纯、乙酸乙脂、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠。色谱纯：甲醇、乙丙醇、冰乙酸、二乙胺、三乙胺、秋水仙碱、盐酸水苏碱。标准品：秋水仙碱、盐酸水苏碱 。

（3）实验仪器：旋转蒸发仪、真空泵、电热鼓风干燥箱、高效液相色谱仪、超声波清洗仪、 Agilent 气质联用仪。

2 实验方法

（1）天南星总生物碱的制备方法：称取天南星粗粉200g，加规定量甲醇浸泡三次，溶剂量依次为1600mL、1200mL、1200mL，每次浸泡12h，常温超声3次，每次20min，抽滤，合并滤液。利用旋转蒸发仪减压回收甲醇，得浸膏。用2%盐酸3 mL搅拌，静止30min后过滤，滤液用1%NaOH3 mL碱化30min，再用石油醚（1：1）萃取3次除杂质，母液用氯仿（1：1）萃取数次，取少量母液用生物碱沉淀剂检验至无生物碱反应，终止萃取。合并氯仿层，减压回收氯仿并干燥至恒量，得到天南星总生物碱[1]。

（2）供试品溶液制备：取20mg天南星总生物碱，用甲醇溶解定容至50ml容量瓶中，再精密吸取1ml置于10ml容量瓶中，定容。

（3）对照品溶液制备：精密称取秋水仙碱标准品10mg，用甲醇溶解至100mL容量瓶中，定容，得浓度为0.1mg/mL的对照品溶液，备用。

（4）色谱条件：色谱柱：CenturySIL C18-BDS （250mm×4.6mm，5μl）、 流动相：甲醇-异丙醇-冰乙酸-二乙胺-水（20：5：0.25：0.5：75）、检测波长：254nm、流速：1.0mL/min、柱温：40℃。

（5）标准曲线的确定：精密吸取对照品溶液1ml、2.5ml、4ml、5.5ml、7ml、8.5ml，分别置于10ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度线，摇匀，过滤，在上述色谱条件下进样20μl。以秋水仙碱的峰面积Y对秋水仙碱的浓度X（mg/ml）绘制标准曲线和回归方程。得到标准曲线为，Y=3×106X-2442.5，R2=0.9981。以上结果表明秋水仙碱在0.01～0.085mg/ml范围内浓度与峰面积成良好线性关系。

（6）方法学考察。1）精密度实验：取秋水仙碱对照品溶液，浓度为0.04mg/ml，注入液相色谱仪，连续进样5次，考察精密度，计算相对标准偏差。2）稳定性试验：精密吸取“3.2供试品制备”项下供试品溶液，按上述色谱条件下，每次进样均为20μl，在0，2，4，8，10，12，24h分别测定，考察其稳定性。3）加样回收率试验：取已知含量的天南星总生物碱2.00mg，精密称定，共5份，依次精密移取0.1mg/ml的秋水仙碱对照品溶液28.5ml，按样品溶液制备方法制备。精密吸取样品溶液20μl，在上述色谱条件下测定峰面积，计算秋水仙碱含量，并求得回收率。结果见表1。

（7）样品含量测定。取200 mg天南星总生物碱，用甲醇定容至50 ml容量瓶中，在精密吸取1ml置于10ml容量瓶中，定容。按上述色谱条件下，进样20μl，分别测定六个产地的天南星及制南星中秋水仙碱含量。结果见表2。

3 结果与分析

3.1 秋水仙碱含量测定结果

通过表3可以看出吉林天南星中秋水仙碱的含量与河南广西云南安徽的天南星相比，差异极显著；与河北产地天南星相比差异显著。

3.2 方法学考察结果

（1）精密度实验结果。取秋水仙碱对照品溶液连续进样5次测得峰面积平均值为106461.6，计算RSD值为1.84%（n=5），且RSD<2%，符合05版《中国药典》规定，结果表明精密度良好。

（2）稳定性实验结果。按上述色谱条件下考察其稳定性。测得v峰面积平均值为168859.29，计算RSD=0.12%（n=7）<2%，符合05版《中国药典》规定，结果表明样品中秋水仙碱在24h内含量稳定、无变化。

（3）加样回收率测定结果（见表1）。结果表明：平均加样回收率为99.72 %，RSD = 0.364 %<5%，符合2005《中国药典》规定。

4 结论

河南产地天南星中秋水仙碱含量最高，安徽产地天南星秋水仙碱含量最低。六个产地天南星中秋水仙碱含量从高到低的顺序是河南、吉林、河北、云南、广西、安徽。

参考文献：

[1]武刚毅，谭政.天南星的炮制研究概述[J].中国药师，2004，（12）：156.

作者简介：柳莲（1981-），女，吉林白城人，硕士，讲师，研究方向：制药工程、化学工程。

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