蜈蚣草孢子萌发的最适培养基研究
时间:2022-03-25 08:25:40 浏览次数:次
材料及方法
1.1 实验材料
蜈蚣草成熟的孢子(采自湖北宜昌)。
1.2培养基配方
(1)MS培养基,(2)将原来MS 培养基中pH值调为7.0,另外在培养基中加入CaCO3粉末。
1.3操作步骤
1.3.1 培养基的配置。按照培养基配方分别配置MS和MS(改)培养基,将各种液体试剂按照用量规格加入1000ml大烧杯中,轻轻摇匀后,用pH试纸进行溶液酸碱度测定,在烧杯中加入盐酸或氢氧化钠将pH调到培养基所要求的范围之内;之后称取相应分量的琼脂加入烧杯中,在加入适量蒸馏水,放置于微波炉中加热知道琼脂全部溶解,溶液为透明的为止。
1.3.2 分装培养基。将煮好的培养基冷却至50℃左右时分装到各个培养盒中,每盒大约装盒子的2/5,然后等待培养基冷却凝固。
1.3.3 播孢。待培养基凝固后,将蜈蚣草孢子均匀地撒在培养基表面,盖上盖子,保持空气的流通。
1.3.4 培养。将撒上孢子的培养基放置于25℃的恒温箱中,日光灯作为光源,光照强度为2000~3000Lx,光照时间16h/d。
1.3.5 观察记录。培养期间每天到实验室进行观察,记录孢子萌发的时间,萌发情况,原叶体形成时间及形成情况等。
1.3.6 数据分析。将观察到的试验结果,数据进行分析整理,找出最适合蜈蚣草孢子萌发的培养基。
2 结果与分析
从播孢后的第2天开始记录,我们发现培养基中的萌发情况大概为:
13d 后各培养基先后出现绿色小点,孢子开始萌发,17d 后出现绒毛状丝状体,23d 后孢子发育成绿色,逐渐形成叶片状原叶体且体积不断增大,40d 后绿色块状周边形成绿色紧密球,球状体在培养基上迅速增殖并在较短时间内形成疏松的群体块;随着小球状体的继续增殖而不断变大,60d 后逐渐形成芽,并开始分化出小叶片,即孢子体。
通过实验观察可以得到以下2组图表(图1、2)。
考虑到蜈蚣草的生长环境是偏碱性的,所以此次研究不仅继续利用传统MS培养基进行培养对照,还对MS培养基进行改动,主要是提高培养基的pH值,以接近蜈蚣草真实的生活环境。在培养基中加入CaCO3粉末,也是增强碱性环境。实验结果表明,改良的MS培养基更适合蜈蚣草孢子萌发,有利于蜈蚣草的快繁研究。
3 研究展望
据国际上的报道,在正常土壤中普通植物的含砷量一般不超过3mg/kg,我国谷类作物的含砷背景值为0.07~0.08mg/kg,豆类为0.02~0.56mg/kg,蔬菜类为0.001~0.039mg/kg,木本植物小于0.78kg/mg。蜈蚣草的最大含砷量约相当于普通植物体中大量元素磷的含量, 比普通植物的含砷量高数万倍、甚至数十万倍。
参考文献
1 周向军.砷超富集植物蜈蚣草的离体培养及植株再生[J].资源开发与市场,2010(8)
2 韩德伟,关丽霞,王振龙.铁线蕨孢子组织培养与快速繁殖研究[J]. 安徽农业科学,2010 (29)
(责任编辑 王蔓)
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