血水草提取物对福寿螺的杀螺效果

摘要：利用溶剂浸提的方法获得血水草根茎的醇提物和水提物，通过室内生物测定的方法就血水草根茎提取物对福寿螺的杀螺效果进行了检测。结果显示，在２５０～４ ０００ μｇ／ｍＬ的浓度范围内，血水草醇提物对福寿螺卵的孵化抑制率、幼螺和成螺的相对毒杀率分别为３０．２２％～１００.00％、１２．３６％～８６．５２％和５．５６％～３６．６７％；水提物对福寿螺卵的孵化抑制率、幼螺和成螺的相对毒杀率分别为１５．１１％～４２．４５％、７．８７％～３４．８３％和３．３３％～２８．８９％。综合结果表明血水草醇提物对福寿螺的毒杀作用强于水提物，具有开发为植物源杀螺剂的潜力。

关键词：血水草；福寿螺；提取物；杀螺效果

中图分类号：Ｓ４８２．３９文献标识码：Ａ文章编号：0439－８114（２０11）07－1390-04

Ｅｆｆｉｃａｃｙ ｏｆ ｔｈｅ Ｅｘｔｒａｃｔ ｆｒｏｍ Ｅｏｍｅｃｏｎ ｃｈｉｏｎａｎｔｈａ Ａｇａｉｎｓｔ Ａｍｐｕｌｌａｒｉａ ｇｉｇａｓ

ＺＨＯＵ Ｂｉｎｇ，ＺＯＵ Ｙｏｕ，ＹＡＮ Ｘｉａｏ－ｈｏｎｇ，ＬＩＵ Ｍｉｎｇ－ｘｉｎ，ＺＨＯＮＧ Ｊｕａｎ，ＪＩＡＮＧ Ｐｉｎｇ

（Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， Ｊｉｎｇｇａｎｇｓｈａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ， Ｊｉ’ａｎ ３４３００９， Ｊｉａｎｇｘｉ，Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｍｏｌｌｕｓｃｉｃｉｄａｌ ｅｆｆｉｃａｃｙ ｏｆ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔ ｆｒｏｍ Ｅｏｍｅｃｏｎ ｃｈｉｏｎａｎｔｈａ ｏｎ Ａｍｐｕｌｌａｒｉａ ｇｉｇａｓ ｗａｓ ｃｏｎｄｕｃｔｅｄ ｂｙ ｂｉｏａｓｓａｙｓ under ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｕｇｇｅｓｔｅｄ ｔｈａｔ ａｔ ｔｈｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ｆｒｏｍ ２５０ ｔｏ ４ ０００ μｇ／ｍＬ， ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｏｆ ｅｔｈａｎｏｌ ｅｘｔｒａｃｔ ａｇａｉｎｓｔ ｓｎａｉｌ ｅｇｇｓ， ｒｅｌａｔｉｖｅ ｋｉｌｌｉｎｇ ｒａｔｅ ａｇａｉｎｓｔ ｙｏｕｎｇ ａｎｄ ａｄｕｌｔ ｓｎａｉｌｓ ｗｅｒｅ ３０．２２％～１００．００％，１２．３６％～８６．５２％ ａｎｄ ５．５６％～３６．６７％ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ， ａｎｄ ｔｈｏｓｅ ｆｏｒ ｗａｔｅｒ ｅｘｔｒａｃｔ ｗｅｒｅ １５．１１％～４２．４５％，７．８７％～３４．８３％ ａｎｄ ３．３３％～２８．８９％ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ． Ｉｔ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｃｏｎｃｌｕｄｅｄ ｔｈａｔ ｍｏｌｌｕｓｃｉｃｉｄａｌ ｅｆｆｉｃａｃｙ ｏｆ ｅｔｈａｎｏｌ ｅｘｔｒａｃｔ ｗａｓ ｓｔｒｏｎｇｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｆ ｗａｔｅｒ ｅｘｔｒａｃｔ； ｅｔｈａｎｏｌ ｅｘｔｒａｃｔ ｈａｄ ｔｈｅ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｆｏｒ being devetoped ａｓ ｐｈｔｏ－ｍｏｌｌｕｓｃｉｃｉｄｅ．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ｅｏｍｅｃｏｎ ｃｈｉｏｎａｎｔｈａ； Ａｍｐｕｌｌａｒｉａ ｇｉｇａｓ； ｅｘｔｒａｃｔ； ｍｏｌｌｕｓｃｉｃｉｄａｌ ｅｆｆｉｃａｃｙ

血水草（Ｅｏｍｅｃｏｎ ｃｈｉｏｎａｎｔｈａ Ｈａｎｃｅ）是罂粟科（Ｐａｐａｖｅｒａｃｅａｅ）血水草属（Ｅｏｍｅｃｏｎ）植物，特产于长江以南各省和西南山区，为我国独属独种的特有物种［１］。目前，针对血水草的研究主要集中在解剖学［２，３］、化学成分［４－７］及生物活性方面［８］。其代谢产物的生物活性主要表现为抗菌［９，１０］、抗肿瘤［１１－１３］、灭螺［１４－１６］、杀血吸虫［１７，１８］等。其中在灭螺活性方面，关注最多的是代谢产物对钉螺的灭螺活性，而关于血水草代谢产物对福寿螺（Ａｍｐｕｌｌａｒｉａ ｇｉｇａｓ Ｓｐｉｘ）的灭螺效果未见报道。为进一步探讨血水草的开发价值，本文通过溶剂浸提的方法获得血水草地下根茎代谢产物，再通过室内生物测定的方法检测了代谢产物对福寿螺卵孵化的抑制作用、对幼螺和成螺的毒杀作用，探讨了血水草代谢产物杀灭福寿螺的潜力，为将血水草开发成植物杀螺剂提供理论依据。

１材料与方法

１．１试验材料

供试血水草植株于２００８年９～１０月采自井冈山水口，采收时处于果期，由井冈山大学生命科学学院肖宜安教授鉴定。将植株地下根茎收回，清洗干净，于室内通风处自然晾干，剪成１～２ ｃｍ长的小段，再用ＪＺ-７１１４型粉碎机粉碎成粉末备用。福寿螺卵采自吉安市青原区赣江边水稻田沟中，幼螺和成螺均采自吉安市青原区木山村农田。

１．２提取物的制备与溶液配制

取粉碎后的血水草根茎粉末２ ｋｇ，先用９５％乙醇超声波振荡浸提，重复３次，每次浸提６ ｈ，收集浸提液，过滤除残渣，减压浓缩回收乙醇得棕色膏状物。乙醇浸提后的植物材料再用水浸提，操作方法同乙醇提取，最终同样得棕色膏状物。称取适量的醇提物和水提物，用水配制成４ ０００、２ ０００、１ ０００、５００、２５０ μｇ／ｍＬ不同浓度的提取物溶液，备用。

１．３杀卵作用测定

取产后约７～１０ ｄ色泽一致（粉红略带灰白）的卵块，小心将其弄散，选未受损伤的卵粒５０粒置于加有５ ｍＬ不同浓度的血水草提取物溶液的培养皿中，置（２５±１）℃培养箱中培养，连续１０ ｄ观察其孵化情况，１０ ｄ后统计孵化卵粒数，并计算孵化抑制率。同时设置对照处理（清水处理，ＣＫ，下同），每处理３次重复。

１．４对幼螺的毒杀作用

用２００ ｍＬ烧杯盛放１００ ｍＬ上述不同浓度的血水草提取物溶液，每个烧杯中投放２～３旋的鲜活幼螺３０颗，用纱布封口，以防幼螺逃出。处理后连续５ ｄ检查各处理幼螺死亡情况，并计算死亡率。同时设置对照处理，每处理重复３次。

１．５对成螺的毒杀作用

用铁制的长方形盆（２９．５ ｃｍ×１９．０ ｃｍ×４．５ ｃｍ） 盛放１ ０００ ｍＬ试液，每盆投放３０颗个体较大的成螺，用纱布封口，防止成螺逃出。连续５ ｄ检查各处理成螺的生死情况并计算死亡率。同时设置对照处理，每处理重复３次。

１．６福寿螺死活鉴定标准

福寿螺死活鉴定参考骆悦等［１９］和Ｓａｎｔｏｓ等［２０］的方法，将福寿螺置于处理液后，每隔２４ ｈ取出各处理中的怀疑死螺，将其放入清水中，浮于水面或悬浮于水中对外界刺激无反应的为死螺，沉于水底且活动的为活螺。

１．７数据统计分析

使用Ｅｘｃｅｌ软件进行数据处理，并运用ＳＰＳＳ １３．０统计分析软件进行方差分析。

２结果与分析

２．１血水草提取物对福寿螺卵孵化的抑制作用

不同浓度的血水草提取物处理的福寿螺的卵孵化率均显著低于对照，孵化率随着提取物浓度的升高而降低，孵化抑制率随着浓度的升高而升高。醇提物对福寿螺卵的孵化抑制率在３０．２２％以上，当浓度为２ ０００ μｇ／ｍＬ时，抑制率达到９８．５６％；水提物对福寿螺卵的孵化抑制率也超过１５．１１％，在最高浓度４ ０００ μｇ／ｍＬ时，抑制率达到４２．４５％（表１），表明血水草提取物对福寿螺的卵孵化具有一定的抑制作用。醇提物孵化抑制效果的回归方程为ｙ＝２０．７６０ｘ-１３．１８０，相关系数（ｒ）为０．９８０ ８，抑制中浓度ＥＣ５０为４５０．９３ μｇ／ｍＬ；水提物孵化抑制效果的回归方程为ｙ＝７．８９３ｘ-３．４０５，相关系数（ｒ）为０．９７９ ３，抑制中浓度ＥＣ５０为７ ４０６．５０ μｇ／ｍＬ。

２．２血水草提取物对福寿螺幼螺的毒杀作用

血水草提取物对福寿螺幼螺的毒杀作用效果见表２，可以看出，醇提物和水提物对福寿螺幼螺均具有一定的毒杀作用，且毒杀效果随浓度的升高而增强，醇提物的毒杀效果要强于水提物。在２５０～

４ ０００ μｇ／ｍＬ浓度范围内，醇提物处理的福寿螺幼螺的死亡率显著高于对照，相对毒杀率为１２．３６％～８６．５２％；而在相同的浓度范围内，水提物对幼螺的相对毒杀率为７．８７％～３４．８３％，表明血水草醇提物对福寿螺幼螺具有相对较好的毒杀效果。醇提物幼螺毒杀效果的回归方程为ｙ＝１７．７２０ｘ-２１．５７０，相关系数（ｒ）为０．９９６ ０，抑制中浓度ＥＣ５０为１ ０６１．１５ μｇ／ｍＬ；水提物幼螺毒杀效果的回归方程为ｙ＝６．９６６ｘ-６．２１５，相关系数（ｒ）为０．９９６ ５，抑制中浓度ＥＣ５０大于１０ ０００ μｇ／ｍＬ。

２．３血水草提取物对福寿螺成螺的毒杀作用

表３显示了血水草提取物对福寿螺成螺的毒杀效果，可以看出，提取物对福寿螺成螺具有一定的毒杀作用，毒杀效果随着浓度的升高而增强。２５０～４ ０００ μｇ／ｍＬ醇提物溶液处理的成螺的死亡率显著高于对照，其相对毒杀率为５．５６％～３６．６７％；而５００～４ ０００ μｇ／ｍＬ水提物溶液处理的成螺的死亡率显著高于对照，其相对毒杀率为７．７８％～２８．８９％，２５０ μｇ／ｍＬ水提物溶液对成螺无显著毒杀作用，相对毒杀率为３．３３％。醇提物成螺毒杀效果的回归方程为ｙ＝７．２０６ｘ-９．８５１，相关系数（ｒ）为０．９７４ ７，抑制中浓度ＥＣ５０为８ １４９．３０ μｇ／ｍＬ；水提物成螺毒杀效果的回归方程为ｙ＝５．９０５ｘ-８．０７５，相关系数（ｒ）为０．９８６ ９，抑制中浓度ＥＣ５０大于１２ ０００ μｇ／ｍＬ。

３讨论

福寿螺是原产于南美洲亚马逊河流域的一种大型淡水食用螺。在我国，因盲目引进、大量饲养而管理不善，福寿螺迅速逃逸扩散至田间，成为一种农业有害生物，主要为害水稻、蔬菜及其他水生作物［２１］。同时，福寿螺是人畜共患寄生虫病病原广州管圆线虫（Ａｎｇｉｏｓｔｒｏｎｇｙｌｕｓ ｃａｎｔｏｎｅｎｓｉｓ）的重要中间宿主之一，对人类健康造成很大伤害［２２，２３］。２００３年福寿螺被国家环保总局列为１６种“危害最大的外来物种”之一。目前针对福寿螺的防治主要以化学防治为主，人工防治和农业防治为辅，生物防治处于摸索阶段。化学防治中所使用的有机杀螺剂虽然对福寿螺有一定防效，但对人的皮肤有强烈的刺激作用，有的甚至会致畸致癌，对水生生物有剧毒，对自然界生态平衡有一定破坏，防治成本高，实际应用中有很大局限性［２４］；农业防治和人工防治费时费力，需要大量的劳力物力财力［２５］。因此，国内外都相继开展了福寿螺的生物防治研究。

在植物源杀螺剂方面，章玉苹等［２６］研究发现金腰箭（Ｓｙｎｅｄｒｅｌｌａ ｎｏｄｉｆｌｏｒａ（Ｌ．）Ｇａｅｒｔ）甲醇提取物对福寿螺幼螺有较好的浸杀作用，同时对成螺和卵也具有一定的控制效果。曾坤玉等［２７］和胡飞等［２８］研究发现五爪金龙（Ｉｐａｎｏｅａ ｃａｉｒｉｃａ）具有开发出既能有效防治福寿螺又不影响水稻生长和稻田环境的植物源杀螺剂的潜力。在实验室条件下，Ｊｏｓｈｉ等［２９］发现，从昆诺阿藜（Ｃｈｅｎｏｐｏｄｉｕｍ ｑｕｉｎｏａ）中分离得到的皂角苷对福寿螺有很好的控制效果。最近，董道青等［３０］研究发现夹竹桃（Ｎｅｒｉｕｍ ｉｎｄｉｃｕｍ Ｍｉｌｌ）叶提取物对福寿螺也具有一定的毒杀活性。可以看出，在自然界中存在着可以开发为福寿螺杀螺剂的植物材料。本研究发现了另外一种杀螺植物——血水草。研究结果表明，血水草醇提物和水提物对福寿螺都具有一定的控制作用，从控制效果来看，醇提物的杀螺效果要强于水提物，而且醇提物对福寿螺卵的孵化具有很强的抑制作用，在浓度为２ ０００ μｇ／ｍＬ时，抑制率达到９８．５６％；其对福寿螺幼螺同样具有很强的毒杀作用，在浓度为４ ０００ μｇ／ｍＬ时，相对毒杀率达到８６．５２％；其对福寿螺成螺虽然也有一定的毒杀作用，但毒杀效果不理想，在最高浓度

４ ０００ μｇ／ｍＬ时，相对毒杀率仅为３６．６７％。虽然血水草醇提物对福寿螺的毒杀效果不及现在市面上常用的有机化学杀螺剂贝螺杀、五氯酚钠、辛硫磷和巴丹等，但与金腰箭、五爪金龙、昆诺阿藜和夹竹桃提取物的毒杀效果相当，甚至比夹竹桃醇提物的效果更好。

综上所述，血水草具有开发为福寿螺植物杀螺剂的潜力。同时，有研究表明，血水草生物碱对鲢鱼、鲤鱼和鲫鱼苗具有较低的毒性［３１］，这也为血水草提取物开发为杀螺剂提供了另一方面的理论依据。然而，在活性方面尤其是针对成螺的毒杀活性有待提高，血水草杀螺活性成分需要进一步的分离纯化。另外，本研究尚处于实验室阶段，田间试验还需进一步开展，代谢产物对作物的安全性、对生物多样性的影响、毒理学特性及助剂的筛选等也需要深入研究。

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